图1. 流式细胞术方法验证工作流程概述
1、特异性
2、灵敏度
图2. 重复性：批内精密度实验设计和统计分析示例2。在这个例子中，两名操作员分别在单独的分析中对四个样品进行了三次分析运行。数据也可用于测定间精度。
稳定性验证包括多个方面：
样本稳定性：评估不同储存条件下样本的变化
处理样本稳定性：染色固定后至检测前的时间影响
试剂稳定性：抗体混合试剂的保存期限
评估标准通常是相对于基线值的变化不超过20%，或变化在方法精密度范围内。
方案1：基础验证（研究实验室适用）
适用于非监管环境的研究实验室，是最低要求的验证方案：
验证参数：特异性、LLOD、精密度（重复性和中间精密度）
实验设计：单操作者、单仪器
样本要求：3个以上预期用途样本
文档要求：建议有验证计划，但非强制
适用于内部决策但不提交监管机构的研究：
扩展参数：增加LLOQ、全面稳定性评估
实验设计：因子设计，包含2个操作者和2台仪器
强调文档规范（良好文档实践）
包含样本稳定性和处理稳定性评估
方案3：中等风险临床实验室开发检测
成功的验证遵循"说-做-证"三步骤：
迈杰转化医学流式平台目前承接业务如下：
免疫分型：已验证有60+方法，包括淋巴细胞TBNK分型，T细胞精细分型，B细胞精细分型，细胞增殖活化抑制等方法。
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细胞名称 |
细胞表型 |
功能 |
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总T细胞 |
CD3+ |
来源于胸腺（Thymus），介导适应性细胞免疫应答，在胸腺依赖性抗原诱导的体液免疫应答中发挥重要辅助作用 |
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辅助性T细胞 （Th） |
CD3+CD4+ |
识别外源性的MHCII类分子，通过分泌细胞因子作用于其他白细胞（如B细胞、巨噬细胞、嗜酸性粒细胞、中性粒细胞），从而清除病原体 |
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细胞毒性T细胞 |
CD3+CD8+ |
识别内源性的MHCI类分子（多为内源性的细胞抗原,如病毒感染的细胞和肿瘤细胞等），通过释放穿孔素、颗粒酶等活性成分，消灭被识别的靶细胞 |
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B细胞 |
CD19+ |
产生抗体介导体液免疫应答，还可提呈可溶性抗原，以及产生细胞因子参与免疫调节 |
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NK细胞 |
CD3-CD56+/(CD16+56)+ |
表达非特异性抗原识别受体，可表达一系列与其活化和抑制相关的调节性受体，并通过上述调节性受体对机体“自身”与“非己”成分的识别，选择性杀伤病毒感染或肿瘤等靶细胞 |
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NKT细胞 |
CD3+CD56+ |
能大量产生细胞因子，发挥免疫调节作用。也可以激活其他免疫细胞，对抗肿瘤细胞，提高身体细胞免疫特异性。NKT细胞是联系固有免疫和获得性免疫的桥梁之一 |
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单核细胞 |
CD14+ |
在趋化因子作用下迁移至全身组织器官，分化发育为巨噬细胞或树突状细胞。可以通过炎症信号分子迅速被吸引到感染区域。单核细胞具有明显的异质性，在机体免疫应答和炎症过程中发挥不同作用 |
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中性粒细胞 |
CD66b+ |
是一种吞噬细胞，通过趋化性从血液被吸引到感染组织。通常被认为是先天免疫反应炎症过程中的主要病原体杀伤细胞。 |
受体占位：实验室具备单抗药物，融合蛋白和双抗药物的受体占位开发和验证能力。
流式细胞术方法验证是一个系统过程，需要根据检测的预期用途量身定制。随着技术的发展，如高参数流式细胞术和人工智能辅助分析的出现，验证策略也需要不断演进。通过实施系统化的验证策略，流式细胞术用户能够确保其数据质量，推动该技术在更广泛领域的应用发展。迈杰转化医学聚焦免疫治疗、靶向治疗及化疗相关领域，为客户提供覆盖药物研发与临床应用全流程的生物标志物一站式检测服务。其中流式平台不仅在细胞治疗领域提供出色的PK,PD检测服务，也在抗体药领域提供免疫分型，受体占位等检测服务。为创新药物的临床转化和精准用药决策提供坚实的技术支撑。
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